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流式细胞技术分析的局限性有哪些?

文章来源:未知 发布日期:2021-10-05 10:47 点击次数:
  当然,每种技术都有它的缺点或局限性,FCM也不例外。其局限性主要有以下几方面:(1)有时FCM检测不出恶性细胞或检测出的恶性细胞数量比例低于病理检测的结果。
 

1、流式细胞技术难测出霍奇金细胞


  FCM:一般难以测出霍奇金淋巴瘤中的霍奇金细胞,富含T细胞的大B细胞淋巴瘤细胞及某些大细胞淋巴瘤和浆细胞瘤细胞。通常与以下因素有关:①恶性细胞数量少,肿瘤细胞膜特别是大细胞淋巴瘤和浆细胞瘤细胞>在制作过程中易受破坏致使细胞数量进一步减少;②受大细胞淋巴瘤侵犯的组织有明显纤维化或某些浆细胞肿瘤与骨髓结合紧密,难以将肿瘤细胞从组织中分离或从骨髓中抽出;③淋巴瘤呈局灶性分布,导致FCM分析的细胞悬液中没有恶性细胞或其比例很少,因此,FCM难以发现恶性细胞。
 

 

  而病理组织学或免疫组化可保留全部的组织细胞供分析。
 

2、骨髓穿刺可能导致血液细胞稀释


  骨髓穿刺:可能导致血液细胞稀释,再加上处理标本中红细胞溶解,洗涤细胞过程可导致幼红细胞、粒细胞、恶性细胞丢失,导致FCM报告的恶性细胞比例低于形态学报告的比例。同时比较活检组织细胞印片或细胞涂片与FCM 分析结果,有助于判断FCM可能丢失的细胞。

 

 

3、活检标本须要有数量足够多的恶性细胞


  要求活检标本新鲜并且必须要有数量足够多的恶性细胞。分离后悬液细胞的存活率( viability)最好在85%以上。新鲜活检标本内有明显组织细胞坏死或一些含有大细胞淋巴瘤的组织活检标本从采集到送FCM检测的过程中,如保存不好或送检缓慢可能引起细胞死亡,特别是大B细胞淋巴瘤细胞易死亡,坏死的细胞易与各类抗体产生非特异性结合;而FCM是通过分析活细胞来完成的,因此,FCM可能检测不出恶性细胞,或非特异染色背景高,难以分析。而送病理组织学或免疫组化标本被立即放入固定剂中,从而减少了细胞死亡的影响。为了较好地保留活检组织细胞的活性,组织细胞一旦离开人体,应尽早地置于等渗生理盐水或细胞培养液中,尽量置于4℃条件下送检。