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基因重排分析在淋巴组织增生性疾病研究中的应用有哪些?

文章来源:WU 发布日期:2021-10-07 点击次数:(378)次

1、间期荧光原位杂交(FISH)


  间期荧光原位杂交是在石蜡包埋组织中检测染色体变化及异常的一种高灵敏性,特异性和高分辨率的分子遗传学新技术,对石蜡包埋组织进行FISH检测所用的方法有两种,即在提取的细胞核上进行和直接在石蜡包埋组织切片上进行。采用此方法可以识别特异的染色体易位,有助于淋巴瘤的诊断和鉴别诊断(表6-5)。

 

 
 

2、比较基因组杂交(CGH)


  CGH于1992年由Kallioniemi等首先创建,它是荧光原位杂交基础上结合消减技术发展起来的一种能够快速、全面分析的染色体基因组,甚至分析整条染色体增加和缺失的分子遗传学方法。其基本原理是用不同的荧光染料标记正常的基因组DNA和待测细胞的DNA,再和正常人的中期染色体杂交,通过检测染色体上两种荧光信号的相对强度比率,了解待测组织DNA拷贝数的改变,同时在染色体上定位。CGH技术的广泛应用,在其所具有的快速、简便、全面的优越性得到充分体现的同时,也发现其局限性,如分辨率较低。对于低拷贝数的增加和缺失的分辨率最大为3~10Mb,不能将DNA拷贝数变化与基因或基因标记物直接联系起来。新发展起来的微阵列—比较基因杂交技术能够克服这些缺陷,尤其是cDNA芯片CGH,它是一项建立在芯片技术基础之上的新的CGH方法,其自动化、高通量、高敏感性的特点在很大程度上弥补了传统CGH方法的不足,能够直接确定发生变化的基因并准确定位,而且可以同时进行 DNA拷贝数变化和基因表达水平的分析,更有利于淋巴造血系统肿瘤的研究和临床应用。
 

3、基因芯片


 
  基因芯片技术是一种高通量、高灵敏度、高特异性的基因检测手段,可以同时检测成百上千个基因,对于恶性淋巴瘤细胞基因功能的研究有很大帮助。由于发现的恶性淋巴瘤相关基因越来越多,基因芯片法可以大规模、高通量地进行淋巴瘤基因分析,从而分析出其基因特性,为淋巴瘤的细胞来源、分子分型和临床预后判断提供依据。最近有学者用基因芯片研究了淋巴细胞的2.2万个基因,结果显示BT细胞来源的RS细胞之间只29个基因不同,但是与浆细胞比有216个基因不同。提示RS细胞与淋巴细胞有更好的同源性,而与浆细胞同源性则稍差些,证明HL来源于淋巴细胞。基因的变化反映了淋巴瘤的本质。将来,基因分析的方法必然会在淋巴瘤的分型,预后判断和治疗方案的选择等方面发挥重要作用。