卵巢癌患者血清中的肽结构
文章来源:张
发布日期:2022-04-06
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蛋白质组学技术已经通过两种途径用于卵巢癌的早期检测:鉴别特征性的表达在血浆及尿中的肽,及蛋白质,发现个别的肽或蛋白质生物标志物,并发现一种可以在混合物中进行常规免疫测定方法。
表面增强激光解吸和电离飞行时间质谱(SELDI-TOF)及基质辅助激光解吸和电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)已经被用于分析健康女性及卵巢癌患者血清中的肽结构,且已经报道具有很高的特异性和敏感性队。在过去的6年里,已经开展了计算机系统对这些数据进行分析的研究,但是还没有确定出决定性的成分。此外,其他的研究者证实这些原始分析还有困难,还要确定所用的方法中存在的主要缺点。
SELDI-TOF和MALDI-TOF均使用了质谱测定法在体液中发射特定肽的“条形码”;分析蛋白质是通过其与紫外线(UV)吸收的化合物共同结晶并通过一个紫外激光束的脉冲蒸发。吸收能量分子传递部分能量到肽,造成不同的正离子电荷和质子。这种通过激光作用的离子化释放在电场被加速。一个有特征性的质-荷比从每个肽的速率中产生。在SELDI-TOF中,數个不同类型的表面集中不同类型的蛋白质。
很多变量影响运用SELDI-TOF和MALDI-TOF技术对肽的质谱测定。分析前受试者的状况如性别、年龄和健康状况,收集、处理及储存样本的方法均可影响对样本的质谱分析而导致偏倚。多数的SELDI-TOF仪进行生物标志物分析时经历-段时间信号漂移,部分原因是激光能量衰减。在分析过程中的各种校正往往是主观的和依赖操作者的。
更多的是,血清或者血浆——关于血液的最常用的检测样本——包含着数以千计的不同的蛋白和肽,它们在丰度上差别很大。因为SELDI-TOF可以很容易的鉴别高丰度分子,已确认的早期诊断标志物中是低分子量的可能会漏过。因为肿瘤常常产生很少量的特异性的蛋白,高丰度蛋白可能掩盖了这些有用的标志物。在分析前除去过量的蛋白可以提高敏感性,但是这些特别的技术增加了整个程序的复杂性和潜在变异性。总的来说,缺少诊断敏感性、非特异性蛋白的干扰以及重复性差是主要的缺陷,需要在将肽用于人群筛查之前克服。
第二种蛋白质组学技术的出现在短期内显现出更大的发展前景。例如SELDI已经作为血清学标志物用于来自健康人群的早期卵巢癌的筛查。载脂蛋白A1、转体蛋白、CTAPII这三种标志物组合筛查来自健康人群的卵巢癌。这三种标志物联合CA125诊断卵巢癌的敏感性87%、特异性98%。